Journal article
An activity necessary for in vitro transcription is a DNase inhibitor
Biochimie, Vol.69(11), pp.1199-1205
1987
DOI: 10.1016/0300-9084(87)90147-7
PMID: 3129025
Abstract
A phosphocellulose flowthrough fraction required for accurate transcription
in vitro by RNA polymerase II was found to contain a DNase inhibitor which was necessary to maintain template integrity (Price D.H., Sluder A.E. & Greenleaf A.L. (1987)
J. Biol. Chem. 262, 3244–3255). Starting with a
Drosophila K
c cell nuclear extract, the DNase inhibitory activity has been purified 19 000-fold. In combination with the other necessary fractions, the highly purified inhibitor continues to support reconstruction of transcription. It thus appears to be the only required activity in the original phosphocellulose flowthrough fraction. The inhibitor is a protein which does not bind to DNA or inhibit DNase I, so that it has also been useful in assays for DNA binding proteins in crude, DNase-contaminated fractions.
La fraction non absorbée après passage sur colonne de phosphocellulose, requise à la transcription exacte in vitro par l'ARN polymérase II, contient un inhibiteur de DNase nécessaire au maintien de l'intégrité de la matrice (Price D.H., Sluder A.E. & Greenleaf A.L. (1987)
J. Biol. Chem. 262, 3244–3255). Isolée à partir d'un extrait nucléaire de cellules K
c de
Drosophile, l'activité inhibitrice de DNase a été purifiée 19 000 fois. Combinée aux autres fractions nécessaires, l'inhibiteur hautement purifié supporte toujours la reconstruction de la transcription. II semble donc que ce soit la seule activité indispensable dans la fraction non absorbée originale. L'inhibiteur est une protéine qui ne se lie pas à l'ADN et qui n'inhibe pas la DNase I, de sorte qu'il a pu être utilisé lors de titrations de protéines qui ne se lient pas à l'ADN, dans ses fractions brutes contaminés par des DNases.
Details
- Title: Subtitle
- An activity necessary for in vitro transcription is a DNase inhibitor
- Creators
- Ann E SluderDavid H PriceArno L Greenleaf
- Resource Type
- Journal article
- Publication Details
- Biochimie, Vol.69(11), pp.1199-1205
- Publisher
- Elsevier Masson SAS
- DOI
- 10.1016/0300-9084(87)90147-7
- PMID
- 3129025
- ISSN
- 0300-9084
- eISSN
- 1638-6183
- Alternative title
- Une activité nécessaire à la transcription in vitro est un inhibiteur de DNase
- Language
- English
- Date published
- 1987
- Academic Unit
- Biochemistry and Molecular Biology
- Record Identifier
- 9984024418802771
Metrics
27 Record Views